新技术更迭，快速无菌检测如何取代传统无菌检测？丨医麦新观察
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2020年4月27日/医麦客新闻 eMedClub News/--无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器械具、 原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。
无菌检测是生产中至关重要的一环，我国最新版药典规定，无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检查的要求，检验全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区、工作台面及受控环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度确认。
隔离系统应定期按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环境进行监控测。若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。
传统无菌检测的缺点
我国《药典法》规定，无菌检查法包括薄膜过滤法和直接接种法。只要供试品性质允许，应采用薄膜过滤法。供试品无菌检查所采用的检查方法和检验条件应与方法适用性试验确认的方法相同。
无菌试验过程中，若需使用表面活性剂、灭活剂、中和剂等试剂，应证明其有效性，且对微生物无毒性。
而无论《中国药典》还是欧美日药典“协调无菌检查方法(harmonized sterility test)”都存在如下缺陷：
样品量少，使无菌检查试验检测污染物的能力受到限制，污染程度越轻，出现错误结果的可能性越大。 指定培养基配方和培养条件可能不适合一些微生物的生长。 试验时间长，一个试验周期至少需14 d，不利于企业及早采取纠正措施，也不利于有效期短的产品尽快签发。
快速无菌检测方法应运而生
为克服这些缺陷，欧美等西方国家药典中均有规范无菌试验方法的解释性说明。中国、欧洲和美国药典中也都有微生物替代方法验证指导原则的章节，鼓励使用基于新技术的替代方法。
自21世纪初以来，国际制药工业界在无菌药品生产领域开展了一项重要的检测技术----快速微生物检测(RMM，Rapid Microbiological Methods)，包含快速检出和鉴定。
与常规微生物检测技术相比，快速微生物检测技术自动化或微型化程度高，提高了检测通量，更灵敏、更准确、更精确，重现性好，可明显缩短检测时间，某些技术还可实现实时检测。微生物检测数据的实时获得，使得实验室的被动模式变为主动模式，可在正常生产操作期间，了解工艺过程和成品是否被污染。
美国FDA于2004年9月发布了《无菌工艺指南》，鼓励采用新的微生物检测方法和系统。指南中建议采用快速遗传学法鉴别微生物，研究显示这类方法比生化法和表型技术更准确，更精密。指南中还提到其他适用于环境监测、在线工艺控制的快速微生物测试方法。
近年来生物检测技术高速发展并迅速向制药领域渗透。当前RMM各类技术平台已经能够检测到多种微生物及变异微生物；能明确样品中微生物的数目；识别微生物的属、种和亚种。这些技术主要分为基于微生物培养的快速发现和鉴定技术、活细胞识别鉴定技术和基因及芯片识别鉴定技术。
目前各国药典收载了关于RMM的通则。
美国“USP<1223>-替代微生物检测法的确认”，是关于药典收载的官方微生物检测法的替代方法的确认指南。其中引用“USP<1225>-药典收载方法的确认”的分析概念，并与替代方法的定性定量系统相结合。
欧洲“EP 5.1.6章-微生物质量控制替代法”中叙述了微生物质量控制替代法(EP，2007)，包括定性、定量、鉴别方法及确认所用标准，如准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。有生物发光技术的替代方法确认方案的详尽示例。
▲ 各国法规 （图片来源：广州千江）
2020年4月28日（周二）
20:00-21:00
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赵思扬，现任梅里埃工业技术中心行业技术专家（健康护理行业）。毕业于复旦大学临床医学专业，曾于华山医院消化疾病研究所进行分子生物学、细胞学相关的研究。现负责制药、化妆品及血液制品行业的行业教育、展览论坛支持和标准专家沟通等工作，在梅里埃工作期间主要涉及微生物鉴定、快速替代方法、环境监控、定量菌株等产品方案的支持管理工作，多次在全国制药安全会议上进行相关话题的演讲。
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